主要仪器与试剂

 

　　液相色谱仪、配四元梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、固相萃取仪、超声波清洗器、离心机、固相萃取小柱：OASIS MCX，6mL，500mg。三聚氰胺标准品，纯度99%。

 

　　样品处理

 

　　提取：准确称取经粉碎混匀后样品5.0g，加入50mL 1%三氯乙酸溶液及2 mL 2%乙酸铅溶液，混匀后超声提取30min，高速离心后取上清液待净化。

 

　　净化：将固相萃取小柱（6mL，500mg）置于固相萃取仪样品架上，分别加入5mL甲醇、5mL水活化，再准确移取5.0mL离心液上柱。活化及上 样时，将样品架升至顶部通过调节面板旋钮来调节N2气流小，控制流速不超过1mL/min。然后再用5mL水、5mL甲醇洗涤SPE   柱，弃去洗脱液，将小柱升至顶部调节气阀旋钮自动加压吹干小柱，用5%氨水甲醇溶液5mL洗脱，收集洗脱液用氮吹仪吹干，用甲醇-水（2:8,V/V）定 容至1.0mL,过0.45μm滤膜，上机测定。

 

　　样品提取与净化

 

　　三氯乙酸具有沉淀乳及其制品中蛋白质的作用，而且有助于三聚氰胺的溶解。由于三聚氰胺呈弱碱性。（弱阳离子化合物），采用阳离子交换柱进行净化可达到去除杂质，提高检测灵敏度、重现性和回收率的效果。

 

　　固相萃取仪的应用

 

　　固相萃取仪具有、简便的特点。它可通过该装置中的气流调节阀来控制小柱流速的大小，并可直接吹干小柱，保证每小柱在活化洗脱过程中具有良好的重现 性。并且可配套不同规格的固相萃取小柱（如1mL，3mL，6mL等）使用，一次操作可同时处理48个样品。我们在奶粉中添加（2.0～50.0）   ug/mL等不同浓度的三聚氰胺，进行加标回收和重现性实验，回收率在95～99%之间。相对标准偏差均小于3%。

 

　　结论

 

　　固相萃取仪的加压操作是通过在固相萃取小柱的上方施加一定压力空气或N2来实现。

 

　　这样可加快过滤速度，控制柱子活化、淋洗、洗脱全过程的流速，使溶液易于进入固定相孔隙，有利于样液与固定相紧密接触，从而提高萃取效果。它克服常规 的手动固相萃取操作费时、不能确保稳定的流速、不同人员操作结果偏差较大的问题，通过简单的控制消除人为操作的误差，保证在短时间内同时处理几十个样品并具有良好的重现性。